丙肝的病原學(xué)檢測(cè)
丙肝的病原學(xué)檢測(cè)
(1)放射免疫試驗(yàn)或酶聯(lián)免疫試驗(yàn)檢測(cè)血清中丙肝抗體。將重組酵母合成的病毒抗原,經(jīng)純化后作包被抗原,并用入射性同位素或酶標(biāo)記后,檢測(cè)血清中丙型肝炎病毒特異性抗體。
(2)免疫組織化學(xué)法檢測(cè)肝組織中丙型肝炎病毒抗原。從感染丙型肝炎病毒的黑猩猩或患者血清中提取免疫球蛋白G組分,用異硫氰酸熒炮素標(biāo)記后作為探針,檢測(cè)肝內(nèi)丙肝抗原,用放射免疫試驗(yàn)和酶聯(lián)免疫試驗(yàn)檢測(cè)該異硫氰酸熒光素標(biāo)記的免疫球蛋白G,丙肝抗體為強(qiáng)陽(yáng)性。用該熒光素標(biāo)記物檢測(cè)4只急性丙型肝炎黑猩猩和3只慢性丙型肝炎黑猩猩肝組織,丙肝抗原均為陽(yáng)性;12份丙肝抗體陽(yáng)性的慢性丙型肝炎患者的肝組織,其中7份丙肝抗原陽(yáng)性,用阻斷和吸附試驗(yàn)證明,肝細(xì)胞內(nèi)丙肝抗原與丙肝病毒引起的病毒性肝炎有關(guān),該抗原是丙肝病毒感染的一種特異形態(tài)學(xué)標(biāo)志,可作為丙型肝炎病毒感染的實(shí)驗(yàn)室診斷方法之一。
(3)半定量聚合酶反應(yīng)試驗(yàn),測(cè)定肝組織和血清中的丙肝病毒核糖核酸。其出現(xiàn)較丙肝抗體早,如1只黑猩猩,于感染丙肝病毒后28天,轉(zhuǎn)氨酶明顯升高,并有臨床癥狀,從感染后25天收集的血漿,檢測(cè)丙肝抗體陰性,但丙肝病毒核糖核酸陽(yáng)性,第32天仍可測(cè)到遭受病毒核糖核酸,但丙肝抗體為陰性,第70天丙肝病毒核糖核酸轉(zhuǎn)陰,但丙肝抗體轉(zhuǎn)陽(yáng)。又如另1只丙肝病毒慢性感染的黑猩猩,其丙肝抗體為陰性,但丙肝病毒核糖核酸呈強(qiáng)陽(yáng)性。因此聚合酶反應(yīng)試驗(yàn)檢測(cè)丙肝病毒核糖核酸,靈敏度高,出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)早,持續(xù)時(shí)間長(zhǎng),是提高丙型肝炎病原學(xué)診斷和判斷傳染性的一項(xiàng)有用的方法。
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